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產品中心 >分子生物學 >現貨shRNA克隆
現貨shRNA克隆
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在搜索欄填寫基因名稱進行預制shRNA產品搜索

 

吉滿生物針對客戶提供的靶基因找出干擾的靶點序列,并設計成帶有發夾結構的shRNA序列(小發夾結構RNAi)將其裝于表達載體中,我公司提供多套RNAi表達載體,可用于人、小鼠、大鼠以及其他物種的全基因組范圍內的基因表達抑制研究。

各種SiRNA制備方法比較

比較項目

化學合成siRNA

DNA載體shRNA

慢病毒載體shRNA

RNA干擾持續時間

<72小時

<10

>30

適合細胞系

轉染效率大于70%細胞

轉染效率大于20%細胞

幾乎所有細胞

單次制備費用

重復使用費用

構建穩定表達siRNA的細胞株

不滿足

滿足,但有風險

滿足,可以同時制備多種穩定表達細胞系

組織特異性干擾實驗

不滿足

滿足

滿足

干細胞分化實驗

不滿足

不滿足

滿足

裸鼠荷瘤實驗

低重復性

低重復性

高重復性

 

應用范圍:

  • 基因功能研究
  • 信號通路分析
  • 基因過表達的確證


常用檢測方法:

  • qRT- PCR:shRNA通過與靶基因mRNA結合后,導致mRNA的切割和降解,可以降低靶基因的蛋白的表達。設計目的基因的qRT-PCR引物,通過qRT-PCR檢測mRNA變化,確定knockdown效率。
  • western blot:通過檢測干擾靶基因目的蛋白的表達水平的下調,確定shRNA 對靶基因的表達抑制作用。
  • 基因功能檢測:通過生物和生化的終點分析方法,分析細胞增殖、克隆形成、細胞周期、細胞遷移等,根據目的基因具體的功能而定。

 

可選RNAi載體:

載體編號

元件順序

用途

基因導入

真核抗性

熒光標記

pGMLV-SB1

hU6-MCS-CMV-eGFP

RNAi

慢病毒載體

/

eGFP

pGMLV-SB3

hU6-MCS-CMV- Puromycin

RNAi

慢病毒載體

Puromycin

/

pGMLV-SB4

hU6-MCS-CMV- RFP

RNAi

慢病毒載體

/

RFP

pGMLV-SB5

hU6-MCS-EF1α- eGFP

RNAi

慢病毒載體

/

eGFP

pGMLV-SB6

hU6-MCS-UBC- eGFP

RNAi

慢病毒載體

/

eGFP

pGMLV-SC2

CMV-RFP-hU6-MCS-PGK-Puromycin

RNAi

慢病毒載體

Puromycin

RFP

pGMLV-SC5

hU6-MCS-CMV-eGFP-PGK-Puromycin

RNAi

慢病毒載體

Puromycin

eGFP

pGMLV-SC6

hU6-MCS-CMV-RFP-PGK-Puromycin

RNAi

慢病毒載體

Puromycin

RFP

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貨號

產品類別

名稱

載體

規格

價格

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