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技術服務 >細胞生物學 >熒光定量PCR檢測服務
熒光定量PCR檢測服務

服務概述:

實時熒光定量PCR(Real Time PCR)技術,是指在PCR指數擴增期間通過連續監測熒光信號強弱的變化來即時測定特異性產物的量,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。熒光定量PCR的熒光檢出方法包括SYBR green(熒光染料摻入法) 和Taqman probe (探針法)兩種方法。


吉滿優勢:


  • 采用ABI7500Fast實時熒光定量PCR儀,提供可靠的數據。
  • 嚴格的質控標準,豐富的引物設計經驗,確保實驗成功。
  • 覆蓋多種檢測內容,從mRNA定量到microRNA定量。
  • 零距離溝通,強大的技術支持實時解決您的問題。
  • 完整的實驗報告,讓您輕松分析實驗結果。



結果展示:

 

技術應用:


  • mRNA定量


熒光定量PCR可以對基因的表達進行定量分析,可以通過外標準品定量的制備來實驗基因表達的絕對定量,也可以利用內參相對定量基因表達水平的變化。


  • miRNA定量


MicroRNAs (miRNAs)是一種大小約21—23個堿基的單鏈小分子RNA,是由具有發夾結構的約70-90個堿基大小的單鏈RNA前體經過Dicer酶加工后生成,不同于siRNA(雙鏈)但是和siRNA密切相關。成熟的microRNA是由21-25個核苷酸組成的小RNA,長度太短,并不能通過傳統的實時定量PCR進行檢測,但是通過特殊設計的莖環結構的反轉錄引物,配合實時定量PCR引物及探針可以精確檢測微量樣品中microRNA表達水平。


  • 定性分析


熒光定量PCR還可以用來檢測單核苷酸多態性(SNP)、點突變、等位基因以及DNA甲基化等。能夠簡單快速地對目的基因進行高特異性、高靈敏度的檢測,同時閉管操作的實時檢測可以有效防止反應產物的污染。


吉滿熒光定量PCR實驗流程:

 


客戶需提供:


  • 請提供新鮮材料或直接提供已純化的DNA/RNA,確保總量>5μg/樣品。如果目的基因表達量較低時,應盡量提供更高濃度的總RNA或DNA。
  • 請提供已知的全長基因序列(GeneBank Accession Number、Gene ID)。
  • 請提供盡可能詳細的背景資料:生物物種信息(Human、Mouse、Rat等)、DNA/RNA來源、豐度等。
  • 客戶可以提供引物,沒有引物的情況下,本公司幫助設計合成。



服務價格:

項目流程

內容

周期(工作日)

價格


抽提樣品DNARNA

細胞樣品

5

1-10個:詢價


10-20個:詢價


20個以上:詢價


組織樣品

5

1-10個:詢價


10-20個:詢價


20個以上:詢價


引物設計與合成

優化引物/探針設計及合成(染料法)

5

詢價



RT反應

miRNA反轉錄(加尾法)

5

1-10個:詢價


10-20個:詢價


20個以上:詢價


mRNA反轉錄成cDNA

5

1-10個:詢價


10-20個:詢價


20個以上:詢價


預實驗:熒光PCR體系優化

確定熒光PCR反應條件

5

詢價


標準曲線制作

相對定量(不需)

 

 


絕對定量(需要)

15

詢價


熒光PCR檢測

基因(包括目的基因和內參基因)

10

1-20個:詢價


20-50個:詢價


50個以上:詢價



吉滿提供:


  • RNA抽提和PCR擴增電泳結果的數碼拍照,定量PCR實驗結果原始文件及相關軟件。
  • 供實驗報告,包括實驗方法、步驟、所用試劑、儀器、數碼照片及相關分析數據等,如有必要可以協助客戶進行相關的數據處理和分析。


 

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