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技術服務 > >CRISPR/Cas9服務
CRISPR/Cas9服務

基因組編輯工具----CRISPR/Cas9系統

CRISPR/ Cas9 (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)是最近幾年興起用于靶向基因特定DNA修飾的重要工具。CRISPR是細菌和古細菌為應對病毒和質粒不斷攻擊而演化來的獲得性免疫防御機制。細菌在CRISPRCas9的幫助下,可以經由小RNA分子的引導,靶標和沉默入侵者遺傳信息的關鍵部分。在該系統中,crRNACRISPR-derived RNA)與tracrRNAtrans-activating RNA)結合形成的復合物能特異性識別靶基因序列,并引導Cas9核酸內切酶在靶定位點剪切雙鏈DNA,隨后,細胞的非同源末端連接修復機制(NHEJ)重新連接斷裂處的基因組DNA,并引入插入或缺失突變。我們也可以提供一個外源雙鏈供體DNA片段(Donor)通過同源重組(HR)整合進斷裂處的基因組。從而達到對基因組DNA進行修飾的目的。目前,CRISPR-Cas9系統的高效基因組編輯功能已被應用于多種模式生物,包括人、小鼠、大鼠、斑馬魚、秀麗隱桿線蟲、植物及細菌。

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       Donor Vector

吉滿提供

多種可選方案適應各種細胞:普通載體,Cas9/Donor腺病毒顆粒,Cas9慢病毒顆粒

豐富的HR Donor Vector載體協助完成Gene Knock-OutKnock-inGene標記。

定制gRNAHR供體載體設計服務

基因敲除細胞穩轉株服務


原理示意圖:

 

CRISPRRNAi的區別:

方法

靶標

質粒構建

基因下調

基因敲除

基因定點突變或多點突變

基因組改變

遺傳密碼子改變

遺傳性

RNAi(siRNA,shRNA)

mRNA(轉錄水平)

簡單

yes

 

NO

NO

NO

siRNA:瞬轉 ; shRNA:可借助慢病毒實現遺傳性

CRISPR

DNA序列(基因組水平)

簡單

 

yes

yes

yes

yes

yes

TALEN

DNA序列(基因組水平)

復雜

 

yes

yes

yes

yes

yes


技術優勢

※操作簡單,靶向精確性更高。

※可實現對靶基因單個位點或多個位點同時敲除。

※也可同時對多個靶基因進行敲除。

※可應用于任何物種。

CRISPR/Cas9系統是由RNA調控的對DNA的修飾,其基因修飾可遺傳。

※擁有CRISPR/Cas9腺病毒/慢病毒系統,對分裂期和非分裂期細胞均有感染作用。


客戶提供

1.物種、基因名稱或者基因ID

2.提供靶細胞。


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