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技術服務 >腺相關病毒 >非編碼RNA AAV包裝 >lncRNA腺相關病毒
lncRNA腺相關病毒

服務描述:

長鏈非編碼RNA(Long non-coding RNA, lncRNA)是長度大于 200 個核苷酸的非編碼 RNA。研究表明, lncRNA 在劑量補償效應(Dosage compensation effect)、表觀遺傳調控、細胞周期調控和細胞分化調控等眾多生命活動中發揮重要作用,成為遺傳學研究熱點。

吉滿生物專業lncRNA服務。

 

吉滿服務:

lncRNA過表達

lncRNA干擾

 

服務優勢:

1.  宿主細胞范圍廣:腺相關病毒可以感染廣泛的哺乳動物細胞,重組腺相關病毒能感染分裂期和非分裂期細胞;

2.  滴度高:可以生產出≥1E12vg/ml的高滴度病毒;

3.  表達出的蛋白質可以正確的折疊和修飾;

4.  表達穩定:長期的基因表達潛能;

5.  多種血清型 :AAV1AAV2AAV5AAV6AAV7AAV8AAV9

6.  免疫原性低:AAV2的基因組僅4681個核苷酸,便于用常規的重組DNA技術,進行動物實驗時造成的免疫反應小;7.  安全性高:迄今從未發現野生型AAV對人體致病,重組AAV基因組序列上去除了大部分的野生型AAV基因組元件,進一步保證了安全性;

 

附表1.可供選擇的載體;

附表2.不同血清型AAV的組織嗜親性;

附表3.不同AAV血清型對相同的組織和細胞具有不同的感染效率;

附表4.各種病毒的特點;

 

附表1.可供選擇的載體:

編號

載體類型

載體用途

載體元件

PGMAAV-4895

腺相關病毒

過表達

GPAAV-CAGCAGGSA-MCS-WPRE

PGMAAV-4901

腺相關病毒

過表達

GPAAV-CaMKIIa-MCS-mCherry-WPRE

PGMAAV-4862

腺相關病毒

過表達

GPAAV-CaMKIIa-MCS-WPRE

PGMAAV-4892

腺相關病毒

過表達

GPAAV-CMV-MCS-3×Flag-T2A-eGFP-WPRE

PGMAAV-4890

腺相關病毒

過表達

GPAAV-CMV-MCS-3×Flag-T2A-mCherry-WPRE

PGMAAV-4869

腺相關病毒

過表達

GPAAV-CMV-MCS-3×Flag-WPRE

PGMAAV-4866

腺相關病毒

過表達

GPAAV-CMV-MCS-eGFP-3Flag-WPRE

PGMAAV-4878

腺相關病毒

過表達

GPAAV-CMV-MCS-WPRE

PGMAAV-4891

腺相關病毒

過表達

GPAAV-EF1a-eGFP-MCS-WPRE

PGMAAV-4889

腺相關病毒

過表達

GPAAV-EF1a-MCS-WPRE

PGMAAV-4896

腺相關病毒

過表達

GPAAV-GFAP-MCS-WPRE

PGMAAV-4894

腺相關病毒

過表達

GPAAV-hSyn-eGFP-MCS-WPRE

PGMAAV-4907

腺相關病毒

過表達

GPAAV-hSyn-MCS-mCherry-WPRE

PGMAAV-4864

腺相關病毒

過表達

GPAAV-hSyn-MCS-WPRE

PGMAAV-PA0

腺相關病毒

過表達

PGMAAV-CMV-intron-MCS

PGMAAV-MA2

腺相關病毒

過表達/miRNA過表達

GPAAV-CMV-mCherry-MCS-WPRE

PGMAAV-MA1

腺相關病毒

過表達/miRNA過表達

GPAAV-CMV-eGFP-MCS-WPRE

PGMAAV-SB1

腺相關病毒

RNAi

PGMAAV-CMV-intron-ZsGreen1-hU6-MCS

PGMAAV-4381

腺相關病毒

RNAi

PGMAAV-CMV-intron-mCherry-hU6-MCS

 

附表2.不同血清型AAV的組織嗜親性:

吉滿生物在包裝腺相關病毒時有多種不同的AAV血清型可供客戶選擇,建議客戶針對不同組織器官選擇相應血清型的AAV病毒,見下表。

血清型

組織親和性

AAV1

肌肉,心臟,骨骼肌(包括心肌),神經組織

AAV2

中樞神經,肌肉,肝臟,腦組織,眼,

AAV3

肌肉,肝臟,肺,眼

AAV4

中樞神經,肌肉,眼,腦

AAV5

肺,眼,中樞神經,關節滑膜,胰腺 

AAV6

肺,心臟

AAV7

肌肉,肝臟

AAV8

肝臟,眼,中樞神經,肌肉

AAV9

心臟,肌肉,肺(肺泡),肝臟,中樞神經

DJ

視網膜,肝臟,肺,腎臟

DJ/8

大腦組織,其他離體組織

Rh10

肺,心臟,肌肉,中樞神經,肝臟

附表3.不同AAV血清型對相同的組織和細胞具有不同的感染效率:

Cell Line

AAV-1

AAV-2

AAV-3

AAV-4

AAV-5

AAV-6

AAV-8

AAV-9

AAV-DJ

AAV-DJ/8

Huh-7

13

100

2.5

0.0

0.1

10

0.7

0.0

500

0.2

HEK293

25

100

2.5

0.1

0.1

5

0.7

0.1

500

0.3

HeLa

3

100

2.0

0.1

6.7

1

0.2

0.1

667

0.2

HepG2

3

100

16.7

0.3

1.7

5

0.3

ND

1250

0.5

Hep1A

20

100

0.2

1.0

0.1

1

0.2

0.0

400

0.1

911

17

100

11

0.2

0.1

17

0.1

ND

500

0.0

CHO

100

100

14

1.4

333

50

10

1.0

25000

5.0

COS

33

100

33

3.3

5.0

14

2.0

0.5

500

0.3

MeWo

10

100

20

0.3

6.7

10

1.0

0.2

2857

1.0

NIH3T3

10

100

2.9

2.9

0.3

10

0.3

ND

500

0.1

A549

14

100

20

ND

0.5

10

0.5

0.1

1000

0.1

HT1180

20

100

10

0.1

0.3

33

0.5

0.1

333

0.2

Monocytes

1111

100

ND

ND

125

1429

ND

ND

100

ND

Immature DC

2500

100

ND

ND

222

2857

ND

ND

200

ND

Mature DC

2222

100

ND

ND

333

3333

ND

ND

100

ND

AAV-2 作為標準,感染效率為 100. ND =未檢測

[1]Grimm D, Lee J S, Wang L, et al. In vitro and in vivo gene therapy vector evolution via multispecies interbreeding and retargeting of adeno-associated viruses [J]. Journal of virology, 2008, 82(12): 5887-5911.

附表4.各種病毒的特點:

病毒表達系統

腺病毒表達系統

慢病毒表達系統

腺相關病毒系統

病毒基因組

雙鏈DNA病毒

RNA病毒

單鏈DNA病毒

是否整合

病毒基因組游離于宿主基因組外,瞬時表達外源基因

病毒基因組整合于宿主基因組,長時間、穩定表達外源基因

低頻整合

感染細胞類型

感染分裂和不分裂細胞

感染分裂和不分裂細胞

分裂和非分裂細胞

表達豐度

高水平表達

高水平表達

高水平表達

表達時間

快(1-2 天)

慢(2-4 天)

快(1-2 天)

滴度

滴度高達1E12pfu/ml

最高可達1E910TU/ml

最高可達1E913TU/ml

克隆容量

可插入高達8kb的外源片段,滴度隨插入片段長度增加而降低

可插入不超過8kb的外源片段,滴度隨插入片段長度增加而降低

可插入不超過3 kb外源DNA片段,滴度隨插入片段長度增加而降低

免疫原性

高免疫原性

低免疫原性

低免疫原性

動物模型

不能得到轉基因動物

可產生轉基因動物,效率達50以上

可產生轉基因動物

啟動子

可以更換特異性啟動子

可以更換特異性啟動子

可以更換特異性啟動子

能否用于MIRCORNA

可以

可以

可以

能否用于四環素誘導

不可以

TET-ONTET-OFF

TET-ONTET-OFF

 

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